不同級別的層流手術室其空氣潔凈度標準不同，例如國內標準I級層流手術室的標準為潔凈度5級，每立方尺空氣中≥0.5μm的塵粒數，≤100顆或每升空氣中≤3.5 顆。II級層流手術室的標準為潔凈度6級，每立方尺空氣中≥0.5μm的塵粒數，≤1000顆或每升空氣中≤35顆。III級層流手術室的標準為潔凈度7級，每立方尺空氣中≥0.5μm的塵粒數，≤10000顆或每升空氣中≤352顆。依次類推。
層流手術室-需保持潔凈舒適的工作環境
要求：
（1）進入手術室必須更換洗手衣褲、鞋帽。
（2）嚴格控制入室人數。
（3）盡量減少層流手術室的開門次數與時間（更不可將門打開不關），維持"相對密閉狀態"，以防外來污染的進入。
（4）手術前用酒精擦拭室內物品、醫療程儀器、設備等。
（5）術后及時、徹底清潔室內所有物品、墻壁及地面。
（6）婦女不可用粉、頭發噴霧劑和指甲油之類的化妝品，以減少污染來源。
（7）工作服應選用不易產生靜電、不易脫落纖維的滌綸和尼龍織物。
（8）定期檢測層流系統功能狀態，測試層流手術室環境空氣潔凈度指標和細菌培養等。
總之，使用層流手術室，強化無菌觀念和正規化管理仍然是醫療程安全的根本保證與要求，仍然是手術室工作之根本、之重點，只有當兩者緊密結合起來才是趨于完美的。
層流手術室的設計
坐南朝北，位于建筑的較高處，以保持空氣潔凈、防止院內感染為原則，地面、墻壁可以沖洗。要三區劃分合理：即有非限制區、半限制區、限制區。要有三通道：即工作人員通道、病人出入通道、污物出口通道。材料應防火、耐濕、不易著色，以具有易于清潔等性能的材料為宜。現代化手術室應設計有：空氣凈化裝置、中心供氧、中心吸引等裝置。
